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避孕疫苗研究现状
人口过剩是严重的全球性问题，实行计划生育开发有效的避孕疫苗将成为控制人口增长的理想措施。目前已采用多种方法以确定能够用于发展避孕疫苗的特异性抗原，如：精子抗原、ZP抗原、性激素抗原等，并已证实这些抗原在哺乳动物包括人类中可产生生殖抑制和免疫性避孕效应，目前正在积极支持进一步研究和开发这种有效的免疫性避孕疫苗。本文对免疫性避孕疫苗的开发及相关分子生物学技术的现状做一综述。
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多价精子抗原表位多肽-免疫刺激复合物的抗生育作用研究
目的提高多价小鼠精子抗原表位多肽的免疫性避孕效应.方法应用固相化学合成法合成具有两种精子抗原蛋白关键表位的35肽,纯化后的多肽与皂甙Quil A及磷脂、胆固醇混合,透析制备多肽-免疫刺激复合物(ISCOMs),并用于免疫雌性C57小鼠.结果合成后的35肽经纯化后纯度大于95%,经质谱仪鉴定质荷比与理论值一致;透析法制备的多肽-ISCOMs在电镜下呈规则的蜂巢样、由多个亚单位构成的开放型结构;免疫后小鼠的血清及阴道冲洗液中特异性IgG和IgA高分别为1∶18 000和1∶1 600;同时受孕率降为20.0%,显著低于对照组(P≤0.01).结论多肽-ISCOMs复合物具有独特的蜂巢样结构,其应用可显著提升多肽的免疫效应,尤其是粘膜免疫,获得较好的免疫性避孕效果,具有广阔的应用前景.
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靶向干扰睾丸支持细胞功能的重组避孕疫苗的构建与表达
目的 构建含小鼠卵泡刺激素(亚单位(FSH-β)与闭锁因子(Ocln )特定基因片段的重组质粒,以期获得靶向干扰睾丸支持细胞功能的重组避孕疫苗.方法 运用PCR 技术,分别扩增小鼠FSH-β亚单位特定基因序列和闭锁因子第二个胞外环序列片段;定向克隆到pET28b表达载体中;并运用免疫印迹法对重组蛋白的表达做初步鉴定.结果 通过双酶切分析、测序鉴定证实特定的FSH-β亚单位和Ocln基因片断被成功克隆到pET28b中,且诱导表达的重组蛋白能够被抗小鼠FSH-β及抗O cln抗体所识别.结论 重组分子具有两种靶分子的抗原性,为进一步研究其生物学活性及免疫避孕效应奠定基础.
