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线粒体加工肽酶文献资料
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线粒体加工肽酶干扰RNA真核表达载体转染 PC12细胞系的构建及鉴定
目的 利用干扰RNA技术构建线粒体加工肽酶(MPPs)的干扰RNA真核表达载体,稳定转染大鼠PC12细胞来抑制MPPs基因的表达,为研究MPPs蛋白的功能提供实验基础.方法 脂质体转染已经构建好的4个MPPs干扰RNA真核表达载体和阴性对照干扰RNA真核表达载体到大鼠PC12细胞株,G418筛选阳性转染细胞克隆,制备稳定转染5个MPPs干扰RNA真核表达载体的PC12细胞系.用RT-PCR检测MPPs基因表达.结果 获得稳定转染5个MPPs干扰RNA真核表达载体的PC12细胞系,RT-PCR证实所有4个干扰组(siRNA1,siRNA2,siRNA3 and siRNA4)MPPs-mRNA表达均下调,分别达到28%、38%、26%、16%.结论 成功建立稳定转染MPPs干扰RNA的PC12细胞系.通过RT-PCR等相关方法证实MPPs干扰RNA真核表达载体转染PC12细胞成功.
