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  • 从小鼠胚胎干细胞文库中筛选PIASx相互作用蛋白

    作者:郑英;贾筱琴;张露萍;王海燕;孙红亚;梁虹

    目的 应用酵母双杂交系统,从小鼠胚胎干细胞cDNA文库中筛选与PIASx (protein inhibitor of activated STAT x,PIASx)相互作用的蛋白.通过对其相互作用蛋白的筛选和研究,探讨PIASx在干细胞分化中的作用机制.方法 以pGBKT7-PIASx为诱饵质粒,从小鼠胚胎干细胞cDNA文库中筛选出与PIASx相互作用的阳性克隆,对验证后的阳性克隆进行测序及生物信息学分析,进一步采用直接酵母双杂交进行相互作用验证.结果 经过筛选、测序、同源性分析及直接酵母双杂交验证,发现了6种与PIASx相互作用的蛋白.结论应用酵母双杂交系统,共筛选得到了6种不同的基因,其编码蛋白与PIASx相互作用,可能与小鼠胚胎干细胞的增殖与分化相关.对PIASx相互作用蛋白的筛选有助于揭示PIASx在胚胎干细胞中的作用机制.

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