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AFT增强子文献资料
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纳米磁流体介导的重组质粒PEGFP-AFP-hTN Fα对肝癌细胞HepG2的体外杀伤作用
目的 探讨纳米磁流体作为肝癌基因治疗栽体的可行性及AFP增强子能否使外来基因在AFP阳性细胞内高表达.方法 构建重组质粒PEGFP-AFP-hTNFα并通过纳米磁流体分别转染入AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2及AfP表达阴性的宫颈癌细胞Hela.转染12h后,于荧光显微镜下动态观察;48h后,g.T-PCR和Westemblot分析HepG2细胞中hTNFα基因的表达情况,用MTT法检测HepG2细胞的存活,用流式细胞分析HepG2细胞的凋亡.结果 纳米磁流体能将重组质粒PEGFP-AFP-hTNFα转入HepG2细胞,并且其转染效率高于脂质体;KT-PCK及Westemblot证明转染的HepG2细胞有hTNFα基因的表达;MTT及流式细胞分析说明hTNFα基因发挥杀伤细胞作用.结论 纳米磁流体能将重组质粒PEGFP-AFP-hTNFα转染HepG2细胞并获得表达,可作为肝癌基因治疗的基因栽体.采用AFP增强子可使目的基因在HepG2细胞中定向而特异性表达.
