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乙型肝炎病毒MHBst155蛋白促进肝癌细胞HepG2生长的实验研究
目的 研究乙型肝炎病毒羧基末端155位截短的中表面蛋白(MHBst155)对肝癌细胞生长、增殖的影响.方法 以HepG2细胞和稳定表达GFP/MHBst155融合蛋白的HepG2/GFP-MHBst155作为实验细胞,细胞用5-氮-2 '-脱氧胞苷(5-Aza-CdR,20 μmol/L浓度)处理.采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞吸光度值A490,分析细胞生长增殖情况;流式细胞术检测细胞周期变化.结果 72h时HepG2细胞组和HepG2/GFP细胞组的A.分别为(0.67±0.12)、(0.70±0.06),与HepG2/GFP-MHBst155细胞组(1.82±0.09)比较,差异均有统计学意义(t=-27.05、-36.71,P值均＜0.05),而HepG2细胞组与HepG2/GFP细胞组比较差异无统计学意义(t=-1.21,P=0.24).流式细胞术检测显示HepG2/GFP-MHBst155细胞组的G0/G1期细胞比例为(26.23±2.70),明显低于HepG2细胞组(45.20±1.25)和HepG2/GFP细胞组(41.83±2.14),差异均有统计学意义(t=11.03、7.84,P值均＜0.05);而经5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理的HepG2/GFP-MHBst155细胞组G0/G1期的比例为(43.03±1.45),与未处理HepG2/GFP-MHBst155细胞组比较,差异有统计学意义(t=9.49,P＜0.05).结论 MHBst155可能通过缩短HepG2细胞生长的G0/G1期而加快细胞周期进程,从而促进肝癌细胞的生长,其机制可能与MHBst155蛋白诱导生长调控基因的异常甲基化有关.
