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家蝇幼虫抗菌肽Defensins基因的克隆与序列分析
目的克隆家蝇幼虫的抗菌肽 defensins基因并对其进行序列分析. 方法提取家蝇幼虫总 RNA,根据家蝇成虫 defensins基因 cDNA序列设计一对引物, RT-PCR扩增目的基因片段, T-A克隆后测序,应用相关生物信息学软件对该序列进行分析. 结果 RT-PCR扩增出一条约 310bp的目的片段,序列分析表明,其与家蝇成虫防御素基因同源性高达 97%,核酸序列变异主要发生在信号肽区域. 结论成功克隆及分析了家蝇幼虫防御素基因全长编码区 cDNA序列 ,为其下一步的重组表达和生物活性研究奠定了基础.
关键词: 家蝇幼虫 defensins基因 序列分析 克隆 -
大劣按蚊感染约氏疟原虫defensins基因的克隆及生物信息学分析
目的 为探讨大劣按蚊对约氏疟原虫侵入的免疫反应,克隆大劣按蚊的抗菌肽defensins基因并对基因序列进行生物信息学分析.方法 分别提取感染疟原虫的大劣按蚊的蚊胃总RNA,根据冈比亚按蚊defensins基因设计、合成简并引物,进行RT-PCR扩增目的片段,TA克隆后测序并进行序列分析.结果 用简并引物的RT-PCR扩增出约氏疟原虫感染的大劣按蚊的189bp目的片段,序列分析表明与冈比亚按蚊defensins有87%同源性,与白蚊伊蚊defensinsD有88%同源性,为大劣按蚊的defensins基因.结论 成功克隆并分析了大劣按蚊抗菌肽defensins基因,为进一步的重组表达和研究按蚊抗菌肽的生物活性奠定基础.
关键词: 大劣按蚊 defensins基因 克隆 序列分析