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淋巴细胞培养基文献资料
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人外周血淋巴细胞培养基冻干工艺研究
目的 对染色体分析用人外周血淋巴细胞培养基进行冻干工艺进行优化.方法 首先以澄清度和细胞培养分裂相比例为检测指标确定冻干前培养液浓缩倍率.其次运用正交试验设计法L934法,以冻干粉外观、水分残留率、分裂相比例为检测指标,对冻干工艺过程的的预冻、升华干燥、解析干燥等三个阶段的主要参数进行考察和分析,获得主要参数优组合的冻干曲线.后,以优化的冻干工艺生产的三批冻干培养基进行适用性验证.结果 确定冻干前培养液的浓缩倍率为3.0.正交实验分析表明:主干燥时间和主干燥真空压力对细胞分裂相比例的影响有显著的统计学意义(p＜0.05).优化的冻干参数为预冻温度-45℃、时间2h;升华干燥阶段温度从-45℃升温至20℃,时间14 h,真空压力35 Pa;解析干燥阶段的温度维持于28℃,真空压力为1.0Pa,终点测试压力无变化时通入干燥无菌空气至冻干箱内压力为76 kPa后压塞,再通入干燥无菌空气至箱体内压力为1个标准大气压时冻干结束.用优化冻干工艺生产的三批培养基的验证结果显示外观合格率、水分残留率、常温保存180 d后的分裂相比例均符合质量标准要求.结论 优化的淋巴细胞培养基冻干工艺可行,可用于制备常温贮存的人外周血淋巴细胞培养基.
