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牛膝醇提物对Aβ42聚集的抑制作用
目的:观察牛膝醇提物(Nx-E)对Aβ42聚集的抑制作用.方法:Aβ42单独或和Nx-E在37℃,5%CO2培养箱中孵育后,采用硫磺素T(Th-T)荧光分析以及透射电镜观察Aβ42的聚集程度.结果:1 μg*μl-1Aβ42孵育7 d后荧光强度明显升高,电镜观察发现Aβ42以淀粉样纤维结构为主,呈针状聚集;低、中、高三个剂量(7.5、15、30μg*μl-1)的Nx-E与Aβ42共同孵育7 d后,中、高剂量Nx-E与Aβ42的共同孵育产物荧光强度比Aβ42单独孵育明显减弱;形态学观察纤维样结构减少,无定形结构增加,存在大量散在的颗粒.结论:1 μg*μl-1Aβ42孵育7 d已"老化";15和30 μg*μl-1的Nx-E能在一定程度上抑制Aβ42聚集.
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姜黄素体外抑制Aβ42聚集和毒性作用及结合老年斑的研究
目的 为了研究姜黄素对β-淀粉样多肽42 (Aβ42)聚集和神经毒性的影响,以及姜黄素对阿尔茨海默病(AD)患者脑组织中老年斑的结合情况.方法 通过硫磺素T(Th-T)荧光分析Aβ42蛋白体外聚集特点和姜黄素对Aβ42聚集的抑制作用;应用培养的SK-N-SH细胞、MTT法观察不同孵育时间的Aβ42神经毒性以及姜黄素对神经毒性的影响;利用姜黄素自发荧光特性观察其对AD病人海马组织石蜡切片中老年斑的结合作用.结果 Th-T荧光分析结果显示随着孵育时间的延长,Aβ42的荧光强度逐渐加强,在6d时荧光强度明显增加(P＜0.01),加入姜黄素(20μmol/L)能够显著降低Aβ42的荧光值;孵育时间超过0.5d的Aβ42对SK-N-SH细胞均可产生毒性作用,细胞存活率、细胞突起和长度均减小.而经姜黄素(20 μmol/L)治疗后,SK-N SH细胞存活率明显升高,细胞突起增多、变长;姜黄素还能够特异性标记AD病人海马组织中Aβ40/42抗体免疫阳性和免疫阴性老年斑.结论 姜黄素能够有效抑制Aβ42体外聚集,并减小其神经毒性.在AD病人海马组织切片上,姜黄素能够特异性结合AD病人脑中沉积的老年斑,具有比抗体更广泛的老年斑结合能力.上述结果提示姜黄素有可能成为阻止AD发生和阻断疾病进展的治疗性药物.
