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末端快速扩增技术文献资料
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八角莲内闭联异松树脂醇二酯脱氢酶全基因的克隆及分析
目的:通过末端快速扩增(RACE)技术获得临安地区八角莲内闭联异松树脂醇二酯脱氢酶基因的全序列,探讨八角莲内异松树脂醇二酯脱氢酶基因的序列特点.方法:以浙江省临安地区八角莲为材料,根据同源序列法分别进行3′末端 RACE和5′末端RACE,获得闭联异松树脂醇二酯脱氢酶基因的全序列.结果:以八角莲属的八角莲为材料获得闭联异松树脂醇二酯脱氢酶全基因序列为国际首次报道.此cDNA全长序列991bp,5′端非翻译区42 bp,3′端非翻译区112 bp.开放阅读框编码278个氨基酸,分子量为29253.3道尔顿,等电点为6.328.提交GeneBank序列号为EU573789.RT-PCR初步分析发现该酶的mRNA产物在茎内含量丰富.氨基酸序列比对表明闭联异松树脂醇二酯脱氢酶的物种差异性较大.结论:获得八角莲内闭联异松树脂醇二酯脱氢酶全基因.
关键词： 八角莲 闭联异松树脂醇二酯脱氢酶 逆转录PCR 末端快速扩增技术
