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PLC-γ1对PDGF介导的细胞内钙流的影响
磷酸脂酶C-γ1(PLC-γ1)可催化PIP2生成DAG和IP3,后二者被认为是细胞内第二信使.其中IP3可使细胞内钙库的Ca2+释放到胞浆.应用无内源性PLC-γ1小鼠成纤维细胞株,观察在血小板生长因子(PDGF)作用下细胞内钙流的产生情况,发现缺失PLC-γ1的细胞与正常细胞都出现细胞内钙动员.但前者钙流产生较后者值小且峰值出现较晚.这意味着PLC-γ1在PDGF作用下成纤维细胞内钙流的产生过程中有重要作用,当其缺乏时功能可被其它途径代偿.
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PLC-γ1信号通路在H2O2诱导的PC12细胞凋亡中的作用
目的 探讨磷酸脂酶C-γ1(PLC-γ1)信号通路对H2O2诱导的PC12细胞凋亡作用的影响.方法 利用PLC-γ1特异性抑制剂U73122(10 pμmol/L)预处理PC12细胞,阻断50 μmol/LH2O2诱导的PLC-γ1信号通路,Hoechst/P1双染观察细胞形态改变,MTT评估细胞活力,流式细胞仪分析凋亡和坏死细胞比例,DNA电泳验证细胞凋亡状态的改变.结果 H2O2对PC12细胞活力的影响呈时效和量效关系.PLC-γ1信号通路阻断后,PC12细胞出现了凋亡形态学改变,细胞活力明显降低.流式细胞仪检测出现典型的凋亡亚二倍体峰,凋亡细胞所占比例达35.7%,DNA电泳呈现明显的梯形条带.结论 PLC-γ1信号通路在50 μmol/L H2O2诱导的PC12细胞凋亡中发挥重要的保护作用.
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PLC-γ1对血小板生长因子介导的细胞增殖的影响
目的观察磷酸脂酶C-γ1(PLC-γ1)对血小板生长因子(PDGF)介导的细胞增殖的影响.方法应用无内源性PLC-γ1小鼠成纤维细胞株,观察在PDGF作用下细胞增殖情况(包括细胞内钙离子动员及DNA合成),并与正常细胞株对照.结果缺失PLC-γ1的细胞与正常细胞DNA合成显著增强,均出现细胞内钙动员;但PLC-γ1*细胞DNA合成时间显著延长,钙流较PLC-γ1+/+值小且峰值出现较晚(P<0.01).结论 PLC-γ1在PDGF作用下成纤维细胞的增殖过程中有重要作用,当其缺乏时功能可被其他途径代偿.