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聚合酶链反应芯片文献资料
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聚合酶链反应芯片筛选5-氟尿嘧啶对乳鼠心肌细胞心脏毒性差异表达基因的作用
目的 应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)芯片技术观察5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对乳鼠心肌细胞心脏毒性相关基因表达的调控作用.方法 利用差速贴壁法分离培养乳鼠心肌细胞,分为对照组和5-FU刺激组.提取并纯化细胞RNA,紫外分光光度计检测RNA提取物浓度、变性琼脂糖凝胶电泳检测其纯度及完整性.选择包含84个已知心脏毒性相关基因的PCR芯片,采用比较阈值(△△Ct)法分析两组基因的表达差异.以表达差异(即上调或下调)大于2倍的基因为有意义的差异基因.结果 共有48条基因出现差异表达,其中5条基因表达上调,43条基因表达下调.结论 利用PCR芯片技术筛选相关基因,为深入阐明5-FU心脏毒性的作用机制提供了新思路.
