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转基因鱼风波
关键词： 转基因鱼 -
转基因鱼的食用安全性评价及其分子生物学基础
我国的鱼类基因转移育种研究位于世界领先地位,但转基因鱼的安全性及其评价方法的研究才刚刚开始.转基因鱼与植物或陆生动物相比,游动性大,不易跟踪观察,同时,鱼类怀卵量大,生殖周期短,繁殖个体众多,因此可能引发的生态安全问题更为严重.由基因操作过程可能引发的的安全性危险是转基因鱼安全性研究的另一主要问题,主要是嵌合型整合及其导致的遗传稳定性和整合位点效应问题.转基因鱼不育系的培育和外源基因的定点整合是解决这两个问题的主要方法,同时也是转基因鱼食用安全性评价和检测的基础.目前还未见转基因鱼营养学评价、过敏性评价及模式蛋白建立的报道;其次,在转基因鱼的研究中对外源基因整合及表达水平的检测虽然一直都在进行,但以食品安全为目标的检测的基础研究还没有进行.转基因鱼食品安全性评价和检出方法的基础研究势在必行.
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铁过载对斑马鱼成骨影响的机制
目的 通过高通量转录组的方法测序高铁环境生存的斑马鱼与和野生型的斑马鱼,通过比较筛选出铁过载对于成骨影响的通道,通过在体以及离体的一系列实验证实铁过载对这些通道的作用.方法 通过在斑马鱼高铁环境下生存,造成斑马鱼铁过载,在4天后提取其RNA和野生型斑马鱼提取的RNA进行高通量转录组测序比较,筛选出成骨Bmp2通道,并用定量QPCR验证.在体实验中将Runx2a标记的转基因斑马鱼在高铁环境下与正常环境在第九天进行比较,观察其荧光的变化;离体实验中,用Bmp2a带标签的cDNA和Runx2a带标签的cDNA的细胞进行转染,进行荧光素酶报告基因实验,然后用铁干预,观察其变化.结果 通过高通量转录组测序发现高铁对于Bmp2抑制,并用定量验证发现铁过载后Runx2a,Runx2b,sp7等成骨基因均下调,观察发现Runx2a标记的转基因斑马鱼高铁环境下与正常环境相比基因表达明显下调,在细胞转染实验中,荧光素酶报告基因Runx2a在Bmp2a转染下大幅升高,转染铁后Runx2a下降.结论 通过高通量转录组测序,我们发现铁过载对于BMP2的抑制影响,运用在体以及离体的一系列实验证实铁过载对Bmp2的抑制作用从而导致成骨代谢的异常.
关键词： 高通量转录组测序 成骨基因 转基因鱼 骨形态发生蛋白2通道
