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肠黏膜收集器文献资料
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一种新型大量粪便肠黏膜提取方法在结直肠癌筛查中的应用
目的：探讨一种新型的大量粪便肠黏膜提取方法在结直肠癌筛查中的应用。方法收集2014年3—4月间，于南京中医药大学第三附属医院拟行手术治疗的10例结直肠癌患者术前1次完整粪便标本和手术切除癌组织标本。同时收集6例肠镜检查未见异常的6例同期住院患者的肠黏膜组织及1次完整粪便标本。使用自制的肠黏膜收集器（该肠黏膜收集器由上、中、下3个体积为1000 ml容器组成，3层底部均分别有层滤网，孔径分别为100、200及300目，逐层过滤后收集液体）肠黏膜脱落细胞，采用粪便DNA试剂盒提取脱落细胞DNA，检测DNA浓度及纯度（A260／A280），并对提取的粪液以及肠黏膜组织进行甲基化测序。结果 DNA甲基化测序发现，FBN1、SPG20及SNCA基因在10例结直肠癌患者的癌组织和粪便提取液标本中CpG岛均出现甲基化，而在6例对照患者的活检肠黏膜和粪便提取液标本中均未发现甲基化。粪便重量在100 g以下时，粪液收集率在60％～80％之间；粪便重量超过100 g后，粪液收集率不稳定；粪便重量在50～100 g之间时，DNA的A260／A280值在1．6～1．8之间，浓度在5．0～56．1μg／ml之间。结论本研究采用自行设计的大量粪便肠黏膜收集器一次性处理50～100 g粪便时，粪液收集率较为稳定，可获取纯度和浓度较高的DNA，达到检测结直肠肿瘤甲基化状态的需要，便于结直肠癌的筛查。
