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  • 昆母汤对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 bax、bcl-2的影响

    作者:林昌松;陈秀敏;刘清平;徐强;关彤;陈纪藩;刘风震;吴莹

    目的:观察昆母汤醇提液(KMT)对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)B 淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)、bcl-2相关 X 蛋白(bax)mRNA 及蛋白的影响,探讨昆母汤治疗 RA 的部分作用机制。方法滑膜组织取自行关节置换术或关节镜检查术的8例活动性类风湿关节炎(RA)患者,分离出 FLS 并进行原代培养,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察 bax、bcl-2 mRNA 表达的变化,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测bax、bcl-2蛋白含量的变化。结果与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组比较,KMT 高剂量组可以明显促进bax mRNA 表达,明显抑制 bcl-2 mRNA 表达,且 bax mRNA/bcl-2 mRNA 比值明显提高(P <0.05,P <0.01);KMT 中、高剂量组可以提高 bax 蛋白含量,各剂量组均可降低 bcl-2蛋白含量,bax/bcl-2的蛋白比值明显提高(P <0.05,P <0.01),且有一定的剂量依赖性。结论昆母汤可能通过抑制 bcl-2的表达,同时促进 bax 的表达,调节 bax/bcl-2比值来发挥对 RA-FLS 的促凋亡作用,具有治疗 RA 的潜在价值。

  • 昆母汤醇提液对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡及 caspase -3表达的影响

    作者:林昌松;陈秀敏;林云斌;刘清平;徐强;关彤;陈纪藩;刘风震;吴莹

    目的:观察昆母汤醇提液对人类风湿关节炎( RA)成纤维样滑膜细胞( FLS)凋亡及对caspase-3表达的影响,探讨昆母汤治疗 RA 的部分作用机制。方法滑膜组织取自行关节置换术或关节镜检查术的8例活动性 RA 患者,分离出 FLS 进行原代培养,采用流式细胞仪检测法检测昆母汤醇提液对 RA -FLS 细胞凋亡率的影响,采用酶联免疫吸附测定法检测培养上清液 caspase -3蛋白含量的变化。结果昆母汤醇提液和甲氨蝶呤均可显著促进 RA -FLS 的凋亡,且昆母汤醇提液促 RA -FLS 凋亡能力在一定程度上呈剂量依赖性。高剂量昆母汤醇提液可使 TNF -α诱导的 caspase -3表达量增加。结论昆母汤可能通过促进 caspase -3的表达来促进RA -FLS 凋亡,具有治疗 RA 的潜在价值。

  • 昆母汤醇提取物对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖及IL-1β和MMP-3表达的影响

    作者:林昌松;林云斌;陈秀敏;陈纪藩;刘风震;吴莹;刘清平;徐强

    目的:观察昆母汤醇提取物( KMT)对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞( FLS)增殖以及白细胞介素-1β(IL-1β)和基质金属蛋白酶-3(MMP-3)表达的影响。方法将FLS用贴壁分离的方法分离纯化传代,培养同步化后加入含10%胎牛血清的培养液,分为6组,分别加入:(1)不含任何药物的培养液;(2)10 ng/mL的肿瘤坏死因子-α(TNF-α);(3)10 ng/mL的TNF-α和1 mg/L的甲氨蝶呤;(4)10 ng/mL的TNF-α和100μg/mL的KMT;(5)10 ng/mL的TNF-α和200μg/mL的KMT;(6)10 ng/mL的TNF-α和400μg/mL的KMT。采用MTT法对FLS的增殖情况进行分析,通过RT-PCR法观察各药物干预对TNF-α诱导后IL-1β、MMP-3 mRNA表达的影响。结果各药物对FLS增殖的抑制作用呈时间和剂量依赖性;TNF-α可诱导FLS IL-1β和MMP-3 mRNA的高表达,KMT对TNF-α诱导高表达的IL-1β和MMP-3 mRNA均有抑制作用。结论昆母汤可抑制FLS的增殖,通过下调FLS IL-1β、MMP-3 mRNA的表达从而发挥抗风湿作用。

  • 昆母汤佐治活动性类风湿关节炎的临床效果

    作者:林昌松;陈秀敏;林云斌

    目的 观察昆母汤佐治活动性类风湿关节炎(RA)的临床效果.方法 收集符合诊断纳入标准和排除标准的活动性RA患者78例,分为两组,观察组予昆母汤联合甲氨蝶呤、塞来昔布胶囊治疗,对照组仅用甲氨蝶呤、塞来昔布胶囊治疗,疗程12周.观察并记录治疗前后患者临床症状、体征、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)及疾病活动度评分(DAS28),分析病情改善情况.结果 治疗12周后,观察组总有效率97.4%,对照组总有效率82.5%,观察组优于对照组(P<0.05).两组治疗后临床症状、体征均较治疗前有所改善,且观察组改善程度优于对照组(P<0.05).两组治疗后ESR、CRP、RF均有所下降,观察组改善明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).两组治疗12周后DAS28明显低于治疗前(P<0.05),且观察组DAS28明显低于对照组(P<0.05).结论 昆母汤佐治活动性RA疗效确切,值得进一步研究.

  • 昆母汤对类风湿关节炎滑膜细胞增殖及凋亡的影响

    作者:陈秀敏;林昌松;刘清平;徐强;关彤;陈纪藩;刘风震;吴莹

    目的:观察昆母汤醇提液对人类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖及凋亡的影响,探讨昆母汤治疗RA的部分作用机制。方法:滑膜组织取自行关节置换术或关节镜检查术的8例活动性RA患者,分离出FLS进行原代培养,采用流式细胞术检测RA滑膜细胞表面抗原,应用MTT比色法检测醇提液对RA-FLS细胞的生长抑制作用,流式细胞术测定细胞凋亡率。结果:原代培养的RA滑膜细胞中CD90+阳性细胞为(94.78±0.98)%。醇提液对RA-FLS具有生长抑制作用,且具有一定的时间-浓度依赖性。醇提液和甲氨蝶呤均可显著促进FLS的凋亡,且醇提液促FLS凋亡能力在一定程度上呈剂量依赖性。结论:昆母汤可抑制RA-FLS增殖、促进其凋亡,具有治疗RA的潜在价值。

  • 昆母汤对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖及RANKL/骨保护素系统的影响

    作者:林昌松;陈秀敏;林云斌;刘清平;徐强;关彤;陈纪藩;刘风震;吴莹

    目的:观察昆母汤醇提液(KMT)对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)的RANKL/骨保护素系统的影响.方法:采用MTT法进行细胞增殖分析,通过RT-PCR观察RNAKL、OPGmRNA表达强度的变化及RANKL/OPG比值.结果:各干预组抑制RA-FLS增殖呈时间剂量依赖性;各干预组对高表达的RANKL mRNA有抑制作用(P<0.01),对低表达的OPG mRNA,MTX有促进作用(P<0.01),KMT中、高剂量有抑制作用(P<0.05),各干预组对RANKL/OPG比值均也有显著的抑制作用(P<0.01).结论:昆母汤可能通过抑制RA-FLS增殖,下调RANKL/OPG的比值而抑制破骨细胞的分化和功能,发挥抗风湿作用.

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