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大体积直接进样文献资料
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RAM-HPLC在线富集技术检测脑脊液中利福平的浓度
目的 建立大体积直接进样的限进性液相色谱(RAM-HPLC)法,实现脑脊液样品的在线直接进样富集并检测脑脊液中的利福平.方法 以自制限进性填料柱为前处理柱,LunaC18为分析柱,前处理流动相为水—甲醇(95:5,V/V),流速为1mL/min,分析流动相为甲醇-乙腈-10 mmol/L乙酸铵溶液(60:5:35,V/V/V),柱温为25℃,检测波长为254nm.结果 选择100μL为进样体积,其峰面积是进样量为20μL时的5.33倍,有效提高了HPLC的检测灵敏度.利福平在0.25～8μg/mL的浓度范围内浓度和峰面积具有良好的线性关系(r=0.9997),LOD和LOQ分别为0.07μg/mL和0.25μg/mL,日内日间精密度均小于5％,低中高3个浓度下的空白加样回收率为87.69％～102.11％,测定给药(剂量为10mg/kg)2h后的人脑脊液中利福平浓度为0.29μg/mL.结论 该方法简单快速,适用于脑脊液中利福平的富集检测,满足临床个体化用药指导.
