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沟槽结合文献资料
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吡柔比星与c-myc G4-DNA相互作用的研究
目的 研究吡柔比星与c-myc G4-DNA的相互作用,并探讨其可能的抗肿瘤作用机制.方法 采用紫外可见吸收光谱、圆二色光谱(CD)、等温滴定微量量热试验(ITC)、核磁NMR滴定以及荧光能量共振转移(FRET)熔点试验等方法,研究吡柔比星与c-myc G4-DNA的相互作用;采用PCR-Stop方法研究吡柔比星对c-myc G4-DNA复制的抑制.结果在电子吸收光谱中,吡柔比星的特征吸收峰随c-myc G4-DNA浓度的增加出现明显的减色效应和红移,减色率ΔH=9.2%(Δλ=4 nm);根据热力学计算的结合常数Kb为1.0×104 μmol/L;随着吡柔比星的加入,c-myc G4-DNA的圆二色光谱在265 nm处的信号变化均匀缓慢,在300 nm处出现1个负的诱导信号;在吡柔比星作用下,c-myc G4-DNA 5′-末端表面碱基G21~A25发生明显变化,并且熔点升高20.2 ℃;PCR-Stop试验证实,随着吡柔比星浓度的增加,c-myc G4-DNA的复制能力不断减弱.结论吡柔比星能够以沟槽方式与c-myc G4-DNA相互作用,稳定c-myc G4-DNA四链体结构,并抑制其复制功能,吡柔比星抗肿瘤活性可能与它能够结合并稳定c-myc G4-DNA密切相关.
关键词： 吡柔比星 c-myc G4-DNA 沟槽结合 相互作用
