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  • 血根碱与c-myc G4-DNA相互作用的光谱法研究

    作者:胡颖智;沈海辉;邬期望;沈宏;孙悦

    目的 研究血根碱与c-myc G4-DNA的相互作用.方法 采用紫外可见吸收光谱、圆二色谱、变温试验等方法,对血根碱与c-myc G4-DNA的结合常数、结合比例、结合模式及稳定性进行研究.结果 在紫外可见吸收光谱中,血根碱在300~ 350 nm之间的特征吸收峰随c-myc G4-DNA浓度的增加出现明显的减色效应和红移,减色率△H=35.4%(△λ=7 nm),与c-myc G4-DNA结合常数为3.1×104 mol/L;G-四链体/血红素过氧化物酶竞争试验中,血根碱竞争血红素引起吸光度下降;变温试验中c-myc G4-DNA的熔点在血根碱作用下升高4.7℃.结论 血根碱以结合比例为1∶1外部堆积于c-myc G4-DNA,并促使其结构稳定,这可能是血根碱抗肿瘤的分子机制之一.

  • 吡柔比星与c-myc G4-DNA相互作用的研究

    作者:李玉齐;张召;伍孝惠;王成蹊;吴剑;王希成;杨淑玲;梅文杰

    目的 研究吡柔比星与c-myc G4-DNA的相互作用,并探讨其可能的抗肿瘤作用机制.方法 采用紫外可见吸收光谱、圆二色光谱(CD)、等温滴定微量量热试验(ITC)、核磁NMR滴定以及荧光能量共振转移(FRET)熔点试验等方法,研究吡柔比星与c-myc G4-DNA的相互作用;采用PCR-Stop方法研究吡柔比星对c-myc G4-DNA复制的抑制.结果在电子吸收光谱中,吡柔比星的特征吸收峰随c-myc G4-DNA浓度的增加出现明显的减色效应和红移,减色率ΔH=9.2%(Δλ=4 nm);根据热力学计算的结合常数Kb为1.0×104 μmol/L;随着吡柔比星的加入,c-myc G4-DNA的圆二色光谱在265 nm处的信号变化均匀缓慢,在300 nm处出现1个负的诱导信号;在吡柔比星作用下,c-myc G4-DNA 5′-末端表面碱基G21~A25发生明显变化,并且熔点升高20.2 ℃;PCR-Stop试验证实,随着吡柔比星浓度的增加,c-myc G4-DNA的复制能力不断减弱.结论吡柔比星能够以沟槽方式与c-myc G4-DNA相互作用,稳定c-myc G4-DNA四链体结构,并抑制其复制功能,吡柔比星抗肿瘤活性可能与它能够结合并稳定c-myc G4-DNA密切相关.

  • 大黄素与c-myc G4-DNA相互作用的研究

    作者:王新宁;张召;吴孝惠;吴剑;王希成;吴韦黎;梅文杰;周毅生

    目的 研究大黄素与c-myc G4-DNA的相互作用,并探讨其抗肿瘤作用机制.方法 采用紫外可见吸收光谱、荧光光谱、圆二色光谱和热变性试验等方法,研究大黄素与c-myc G4-DNA的相互作用,采用PCR-Stop试验研究大黄素对c-myc G4-DNA复制的抑制作用.结果电子吸收光谱中,大黄素在400~500 nm之间的特征吸收峰,随c-myc G4-DNA浓度的增加出现明显的减色效应和红移,减色率ΔH=51.6%(Δλ=3 nm);随着大黄素的加入,c-myc G4-DNA的圆二色光谱在295 nm出现1个正的诱导信号;c-myc G4-DNA的熔点在大黄素作用下升高3.5 ℃;PCR-Stop试验证实,随着大黄素浓度的增大,c-myc G4-DNA的复制能力不断减弱.结论 大黄素能够以沟槽方式与c-myc G4-DNA相互作用,稳定c-myc G4-DNA四链体结构,并抑制其复制功能.

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