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酶治疗文献资料
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苯丙氨酸氨解酶的包被及其对家兔肠道苯丙氨酸吸收的影响
目的考察苯丙氨酸氨解酶(L-phenylalanine ammonia-lyase, PAL)的包被条件,并考察其对家兔肠道苯丙氨酸吸收的影响. 方法绿豆芽 (Phaseolus radiatus L.)来源的PAL通过光照、硫酸铵盐析和不同的柱层析等制备过程, 使PAL纯化到电泳纯.酶活性的测定用紫外分光光度法,苯丙氨酸含量采用荧光比色法.结果 PAL被纯化了74.6倍,并经聚丙烯酰胺凝胶 (PAG) 固定化(T ∶C=8 ∶30).该固定化酶比活0.153 U·g-1, 固定化百分数为64%. 将PAG固定化酶在人工胃液和人工胰液中保温不同时间后,发现该固定化PAL在1 h后全部失活. 将PAG固定化的PAL过120目尼纶筛网制成微粒,再用硝酸纤维膜包被,在人工胃液中不同时间保温,发现酶活性可维持2.5 h,包被的酶颗粒在光镜下呈球形,直径2～11.4 μm,自然干燥保存1个月不破坏.用硝酸纤维膜包被的PAL与L-苯丙氨酸同时注入家兔小肠腔内,与正常对照比较,PAL对苯丙氨酸有明显消除作用,吸收量减少,血苯丙氨酸浓度上升缓慢.结论 该包被条件温和,PAL损失减少,预期可作为口服的酶制剂应用于临床.
