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  • 磷酸钙法与脂质体法转染HBV全基因组的比较

    作者:李永伟;卢建溪;郭云蔚;陈伟

    目的 比较磷酸钙法和脂质体法转染全长HBV基因组的效率及对HBsAg和HBeAg表达的影响.采用真核细胞报告基因SEAP与HBV DNA共转染人肝癌细胞系HepG2.方法 分别将带有分泌性碱性磷酸酶(SEAP)报告基因的质粒、表达绿色荧光蛋白的PCI-EFGP质粒与HBV DNA共转染HepG2细胞.培养后48h计数表达绿色荧光蛋白的细胞,收取细胞培养上清,用ELISA法测定SEAP活性,IMX法检测HBV表面抗原和e抗原水平.结果 脂质体法转染HBV全基因组的效率明显高于磷酸钙转染法,转染后48h的细胞上清表面抗原和e抗原的袁达也明显高于后者.结论 脂质体转染法转染HBV的效率较磷酸钙转染法高,抗原表达水平高,是体外研究HBV的较理想方法.