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抗肝肾微粒体Ⅰ型抗原抗体文献资料
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SLA和LKM-1的表达纯化及其在自身免疫性肝炎中的初步应用
目的 表达SLA和LKM-1并纯化,初步应用于自身免疫性肝炎的临床诊断中.方法 在已构建的CYPIID6、SLA原核表达载体的基础上表达SLA和LKM-1,并采用NI-NTA琼脂糖珠亲和层析的方法纯化,并将纯化后蛋白用于临床自身免疫性肝炎的筛查.结果 经SDS-PAGE分析后,将两个重组质粒在大肠杆菌M15中表达的产物与控菌比较,含目的基因的转化菌在相对分子质量约47.5×103和50×103处各有一条极浓的蛋白带,将含有目的基因的阳性大肠杆菌筛出,并大量培养,可用IPTG诱导表达的即为目的蛋白.表达的融合蛋白需经过鉴定才可继续纯化,以保证纯化后蛋白的纯度,纯化产物经免疫印迹法鉴定具有抗原活性,即可将所得纯化产物用于临床自身免疫性肝炎患者的筛查.结论 表达纯化的SLA和LKM-1蛋白用于临床自身免疫性肝病,可以为临床诊断提供更多帮助.
