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微电场对胎盘滋养细胞迁移/侵袭相关信号通路活性的影响?
目的：探讨滋养细胞迁移/侵袭相关促分裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节蛋白激酶(MAPK/ERK),磷酸肌醇-3激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)和蛋白酪氨酸激酶/信号转导和转录活化因子3(JAK/STAT3)信号传导通路在微电场刺激下的活化水平。方法将胎盘滋养细胞用场强为150 mV/mm 的直流微电场加以刺激,通过蛋白质印迹法(Western blot)测定电刺激前和后各时间点滋养细胞 MAPK/ERK、PI3K/Akt 和 JAK/STAT3信号传导通路相关活性分子的活化水平。滋养细胞在加电前分别用 MAPK 抑制剂 PD980599(100μmol/L)和 Akt 抑制剂 LY294002(20μmol/L)处理1 h,在上述相应含抑制剂的培养基中用场强为150 mV/mm 直流微电场刺激5 h,观察抑制剂对微电场刺激细胞行为的影响。结果Western blot 结果显示,滋养细胞在150 mV/mm 微电场作用下,p42/44 MAPK Thr202/Thr204位点、Akt Ser473位点于5 min 开始活化,10~60 min 内逐渐加强,STAT3 S727位点在微电场作用下上述各时间点无明显磷酸化水平改变。相应信号通路抑制剂处理后滋养细胞对微电场刺激的应答反应均受到明显抑制。结论微电场对滋养细胞迁移/侵袭功能的影响与 MAPK/ERK、PI3K/Akt 信号通路的活化有关。
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微电场通过非整合素途径活化粘着斑激酶促进滋养细胞迁移/侵袭研究
目的 探讨生理性微电场促进体外培养的人胎盘滋养细胞迁移/侵袭功能是否与滋养细胞表面整合素(integrin)表达有关.方法 用150 mV/mm的直流微电场刺激滋养细胞,时间分别为5、10和15 h,测定其迁移情况并观察细胞形态变化.Western blot检测刺激前后1h内粘着斑激酶FAK活化情况和细胞表面integrinα1、integrinα5、integrinαy和integrinα1蛋白表达水平.结果 在含有10％胎牛血清的培养基中,150 mV/mm电场刺激下滋养细胞向负极定向迁移,迁移速度和距离较对照组明显增加(P=0.021),胞体拉长,垂直于电场方向排列;胞内FAKTyr397位点于刺激后5、10、30、60 min内迅速活化并逐渐加强(P＜0.05);刺激前后滋养细胞表面integrinα1、integrinα5、integrinαV、和integrinα1蛋白表达水平无明显改变(P＞0.05).结论 生理性直流微电场可能通过非整合素途径活化FAK从而促进滋养细胞迁移/侵袭功能,但其详细机制仍需进一步研究.
