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细胞原位荧光染色文献资料
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破骨细胞钠氢转运蛋白集中于线粒体中表达
目的:把RAW264.7和人外周血CD14+诱导成破骨样细胞,检测破骨细胞在成熟过程中钠氢转运蛋白2(Na+-H+ Antiporter 2,NHA2)的转录表达情况,并定位其表达位置.方法:细胞因子RANKL、M-CSF在体外诱导RAW264.7和人外周血CD14+细胞发育成破骨样细胞;RT-PCR检测NHA2在诱导过程中转录水平上所发生的变化；Western blot检测诱导前后此蛋白表达情况;细胞原位荧光染色对其表达进行细胞精确定位.结果:RAW264.7和人外周血CD14+细胞被RANKL、M-CSF诱导成破骨样细胞;RT-PCR结果显示NHA2随着破骨细胞的分化成熟转录水平不断加强；Western blot结果显示此蛋白只表达于成熟的破骨细胞中;细胞原位荧光染色结果显示这个蛋白主要表达于成熟破骨细胞的线粒体中.结论:NHA2作为盐离子载体主要表达于成熟破骨细胞的线粒体中,通过控制线粒体盐离子的代谢平衡来影响破骨细胞的发育分化.
