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离体损伤文献资料
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膜片钳技术在成年大鼠海马脑片应用的初步研究
目的:制备成年大鼠海马脑片,使其适应于膜片钳全细胞记录,并观察海马锥体神经元的电生理特性.方法:选200 g左右的成年SD大鼠,雌雄不拘,10％水合氯醛腹腔注射麻醉,四肢固定,剪开胸腔,夹闭下腔静脉,以0℃切片液进行心脏灌注,断头,取下全脑,置入0 ℃切片液中冰镇3 min,再修块,切片,厚度约350 μm,移入37℃预热的人工脑脊液中孵育1h后,转入23℃水浴中孵育30 min备用.倒置相差显微镜和红外微分干涉相差显微镜观察脑片的神经元形态;全细胞膜片钳记录脑片神经元的电生理学特性.结果:海马CA1区神经元光泽度好,立体感强且突起明显；在进行膜片钳全细胞记录时,封接顺利,并且可以记录到电流和动作电位的变化图形.结论:本方法制备的成年大鼠脑片,可以耐受离体后缺血缺氧造成的损伤,保持电生理活性而适应膜片钳全细胞记录模式.
