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高温处置后人体组织DNA提取研究
目的:研究高温后人体组织DNA的提取方法对DNA-STR分型的影响.方法:用不同浓度TritonX-100处理高温后的人体组织样本,采用Chelex-100提取DNA的方法,经DNA-STR复合扩增,用ABI-3130序列分析仪电泳分离并运用Gene mapper ID V3.2基因分析软件对基因进行分型.结果:用1％ TritonX-100+Chelex-100处理样本后提取DNA,再经QIA quick PCR纯化后可检出全部基因座且基因座能较平衡地扩增.结论:该方法简便易行,实验效果好,是法科学领域中一种值得推荐的方法,尤其适合检案.
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应用免疫磁珠分离混合斑中精子
目的 探讨应用免疫磁珠法分离精子-上皮细胞混合液中精子的可行性.方法 制备不同比例的精子-上皮细胞混合液各15例,分别应用免疫磁珠法及差异裂解法提取精子,经PCR扩增进行DNA-STR分型,比较两者的差异.结果 免疫磁珠可以特异性捕获精子,对精子个数为500～2 000/mL的混合斑STR分型成功率(正确分型13个以上,RFU＞ 200)为93.33％,差异裂解法为46.67％,两种方法存在明显差异(P＜0.05).结论 免疫磁珠可有效分离精子和混合斑中其他成分,在精子个数低于2000个/mL检材中优于差异裂解法.
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不同织物上血斑洗涤后DNA检验结果分析
目的 分析评价织物上洗涤过的血斑DNA检验的效果.方法 取棉、化纤和麻布块各25份,用40μL新鲜血均匀涂制成直径约1.5cm的圆形血斑,样本分为5组,分别在加有皂粉的洗衣机中洗涤1、3、10、30、60min;所有样本用IQ试剂盒提取DNA,用Identifiler PlusTM试剂盒扩增,并进行STR分型检测.结果 各种载体血斑周边处检材中,仅棉布载体洗涤1 min检材检出RFU＜ 200的峰,但等位基因丢失率可达50％以上,不能正确判型.各种载体血斑检材洗涤30min以内均可得到成功分型,但峰高以棉布高、化纤低,洗涤60min时仅棉布血斑检出率为100％,其他载体血斑均有明显的等位基因丢失及非特异性扩增,检出率低于60％.结论 洗涤一定时间后的血迹仍具有DNA分型检验的价值,能否正确提取洗涤后的血迹检材是分型成功的关键,洗涤时间较长的检材判型应谨慎.
