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GM130对胃癌细胞O-糖基化及细胞粘附能力的影响
目的:初步探讨沉默高尔基体基质蛋白130(golgi matrix protein 130,GM130)基因对胃癌细胞MKN-45 O-糖基化及细胞粘附能力的影响.方法:通过siRNA干扰胃癌细胞中GM130的表达水平,用Lipofectamine 2000将GM130-siRNA转染入MKN-45细胞.实验分为GM 130-siRNA组、阴性对照组和空白对照组.分别用qRT-PCR和Western blot检测转染后各组中GM130、N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(polypeptide N-acetylgalactosaminyl transferase 2,ppGalNAc-T2)、核心1β3半乳糖基转移酶(core 1 synthase,glycoprotein-N-acetylgalactosamine 3-β-galactosyltransferase1,C1Gal-T1)、β-半乳糖α-2,3-唾液酸转移酶1(beta-galactoside alpha-2,3-sialyltransferase,ST3Gal-1)mRNA和蛋白表达的变化.应用凝集素流式细胞术检测3组细胞中α2,3唾液酸残基糖链结构的表达水平.肿瘤细胞与内皮细胞粘附实验及基质胶粘附实验检测细胞粘附能力.结果:qRT-PCR和Westem blot结果显示GM130基因与蛋白水平明显受到抑制,表明转染成功;GM130-SiRNA组C1Gal-T1、ST3Gal-1的mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P均＜0.05),ppGalNAc-T2在3组中无明显变化(P＞0.05),α2,3唾液酸糖链结构的表达量降低(P＜0.05),细胞粘附能力下降(P＜0.05).结论:在MKN-45细胞中,下调GM130后,可能通过下调C1Gal-T1、ST3Gal-1的表达影响胃癌细胞O-糖基化,降低肿瘤细胞粘附能力.
关键词： 沉默高尔基体基质蛋白130 RNA干扰 胃癌 糖基化 粘附
