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pJFH-1文献资料
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基于pJFH-1的HCV全基因组扩增方法的建立
目的 基于pJFH-1建立能稳定扩增HCV全基因组的长链PCR方法.方法 以pJFH-1为测试模板,通过优化PCR扩增中各个重要环节,包括引物的选择、甘油和/或DMSO适浓度的筛选、循环条件的摸索等,建立能稳定扩增HCV全基因组的长链PCR方案.结果 高Tm值(>65 ℃)的引物更有利于HCV全基因组的扩增;5%、10%甘油或5% DMSO可显著提高PCR扩增的特异性和扩增效率,且甘油的促进作用优于DMSO;双温法较三温法能获得更高产量的PCR产物.结论 通过优化长链PCR反应体系及条件,成功实现HCV基因全长的扩增.