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人肝再生增强因子对体外单个核细胞PKCα-NF-κB及IL-2的影响
目的 观察人肝再生增强因子(human augmenter of liver regeneration,hALR)对人外周血单个核细胞(periph-eral blood mononuclear cell,PBMC)PKCα-NF-κB及IL-2的影响,探讨hALR免疫抑制机制.方法 用梯度离心法分离正常人PBMC,分成正常对照组、刀豆蛋白A(ConA)刺激组(ConA组)和hALR干预组(ConA+hALR组).ConA组用5μg/mlConA刺激细胞增殖和分泌细胞因子IL-2;ConA+hALR组用30μg/ml hALR对ConA刺激进行干预.于细胞培养0、8、16、32、40 h时,用MTT法测定细胞增殖程度,Weston blot检测细胞内信号通路PKCα-NF-κB表达含量,Fluo-3AM装载检测胞内钙离子浓度,用双抗夹心酶联法检测上清细胞因子IL-2含量.结果 ConA组细胞增殖逐渐加强,16 h时与正常对照组比较具有统计学意义(P<0.05);PKCα、NF-κB表达上调及上清IL-2含量增加趋势一致,在16 h达到高峰(P<0.05).ConA+hALR组细胞没有增殖,PKCα-NF-κB表达及上清IL-2含量高峰后移至32 h.每个时间点各组细胞内Ca2+浓度没有差别.结论 hALR可能通过抑制PKCα-NF-κB通路阻碍IL-2的产生速度进而抑制免疫.
关键词: 人肝再生增强因子 外周血单个核细胞 PKCα-NF-κB IL-2