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兔胎肺Ⅱ型细胞发育与表面活性物质蛋白基因表达的关系及其调节
目的探讨兔胎肺Ⅱ细胞发育程度与表面活性物质蛋白(surfactant proteins, SPs)mRNA表达的关系以及地塞米松(Dex)、TRH、EGF等药物对其的调节作用.方法在孕兔妊娠22～24 d或24～26 d静脉分别给予生理盐水(对照)、Dex、EGF、TRH处理,于妊娠25 d及27 d取胎肺,通过电镜观察兔胎肺Ⅱ型细胞发育程度,采用RT-PCR和Southern blot检测胎肺SP-A、SP-B及SP-C的mRNA水平.结果在妊娠27 d,Dex、EGF及TRH处理组胎肺Ⅱ细胞比对照组更成熟,板层体数量明显多于对照组,糖原含量比对照组少,同时,各处理组27 d胎肺SP-B mRNA水平显著高于对照组,但SP-A和SP-C的mRNA水平在各组间无明显差异.在妊娠25 d,除Dex组胎肺的个别Ⅱ细胞内可见少量未成熟板层体外,对照组和其余处理组胎肺Ⅱ细胞内均未见板层体,相反,所有胎肺均可见大量糖原颗粒.此外,25 d胎肺的SP-B mRNA在对照组、EGF和TRH处理组均无明显表达,仅Dex处理组的部分胎肺可见低水平表达,而SP-A和SP-C mRNA在各组胎肺均有较高水平表达.结论 SP-A、SP-B和SP-C mRNA在兔胎肺表达的时间并不一致,胎肺SP-A和SP-C mRNA的表达和升高早于SP-B mRNA,其水平在妊娠后期的一定时间内相对稳定.SP-BmRNA的检出晚于SP-A和SP-C mRNA,其在胎肺的表达和升高时间与Ⅱ型细胞内板层体的出现和增加时间一致,可能为胎肺Ⅱ型细胞分化和成熟的标志之一.Dex、EGF和TRH产前母体处理均可促进胎兔肺Ⅱ型细胞发育和SP-B mRNA的表达,但在妊娠的较早时间,Dex的调节作用可能比EGF和TRH更明显.
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脂多糖结合蛋白抗体对内毒素诱导的肺Ⅱ型细胞NF-κB活化的影响
目的观察兔抗人LBP多抗对LPS诱导的肺Ⅱ型细胞NF-κB活化的影响.方法原代培养的肺Ⅱ型细胞随机被分为生理盐水对照组、LPS组、加LPS前30min加抗体组、LPS与抗体同时加入组、加入LPS后30 min加抗体组和加LPS 后1 h加抗体组,通过凝胶电泳迁移率改变法(EMSA)检测肺Ⅱ型细胞NF-κB的活性,ELISA测定细胞培养上清中TNF-α和IL-6的含量.结果与对照组相比,LBP抗体早期应用能显著降低LPS诱导的肺Ⅱ型细胞NF-κB活性,并显著降低细胞培养上清中TNF-α和IL-6的含量.结论 LBP抗体能抑制LPS诱导的肺Ⅱ型细胞NF-κB的活化和TNF-α和IL-6产生.
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光气诱导小鼠原代肺Ⅱ型细胞凋亡
目的: 探讨光气是否诱导肺Ⅱ型细胞发生凋亡. 方法: 26只二级BALB/c小鼠,雄性,随机分为两组:染毒组和正常对照组(各13只). 正常对照组小鼠以空气为对照,染毒组小鼠给予11.9 mg/L剂量的光气,时间为5 min, 染毒后4 h,比较两组小鼠肺脏的湿干比、病理学变化. 分离、培养小鼠原代肺Ⅱ型细胞并用电镜观察染毒组肺Ⅱ型细胞凋亡情况. 结果: 11.9 mg/L的光气染毒5 min,小鼠肺脏湿干比(6.42±1.00)比正常对照组(4.25±0.47)显著增加(P<0.05);光镜下观察肺组织可见肺水肿发生;单宁酸染色和电镜鉴定小鼠原代肺Ⅱ型细胞;电镜显示光气染毒肺水肿小鼠原代肺Ⅱ型细胞出现凋亡小体. 结论: 光气染毒可造成小鼠肺水肿并诱导小鼠原代肺Ⅱ型细胞发生凋亡.
