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腺病科文献资料
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hTERT启动子调控的PUMA重组腺病毒的构建与鉴定
目的:构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控的PUMA基因腺病毒载体(Ad-hTERT-PUMA)及带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的腺病毒载体(Ad-hTERT-PUMA-EGFP)。方法采用一系列的分子生物学技术将 p53正向凋亡调控因子PUMA基因插入hTERT的启动子下游,再将EGFP为分子标记插入到PUMA基因下游,终将构建好的载体装入腺病毒。双酶切实验证明重组腺病毒载体 Ad-hTERT-PUMA和Ad-hTERT-PUMA-EGFP构建是否成功。结果载体均成功转配腺病毒。转染12 h后,部分HEK293细胞出现了绿色荧光,可维持到72 h。结论成功构建重组腺病毒载体Ad-hTERT-PUMA和Ad-hTERT-PUMA-EGFP。
关键词: 端粒 末端转移酶 p53正向凋亡调控因子 遗传学 腺病科