首页 > 文献资料
-
荧光PCR方法检测孕妇血浆股儿DNA的β地中海贫血基因突变
目的:利用孕妇血浆中的胎儿DNA进行无创伤性β地中海贫血产前基因诊断.方法:从需要进行β地中海贫血产前基因诊断的高危夫妇中筛选出丈夫为β珠蛋白基因密码子(CD)17、CD43、IVS-II-654、-28突变的杂合子,而孕妇携带与丈夫不同的β地中海贫血基因突变杂合子的家系.从孕妇血浆中提取胎儿DNA;应用荧光聚合酶链反应(PCR)扩增p珠蛋白基因,以基因扫描方法分析血浆胎儿DNA的父源性β珠蛋白基因CDl7、CD43、IVS-II-654和-28突变;与绒毛、羊水或脐血胎儿DNA的p地贫基因诊断结果作对照.结果:12个家系中,5例血浆胎儿DNA检出父源性β珠蛋白基因CDl7、CD43、IVS-II-654、-28突变及相应的正常序列;7例血浆胎儿DNA未检出父源性β珠蛋白基因突变,排除重型β地中海贫血,与绒毛、羊水胎儿DNA的p地中海贫血产前基因诊断结果一致.结论:荧光PCR及基因扫描方法可快速、灵敏地检测孕妇血浆胎儿DNA的父源性β珠蛋白基因突变,排除重型β地中海贫血胎儿.
-
040 从孕妇血浆中分离胎儿DNA行肌营养不良的产前诊断
-
定量检测子痫前期孕妇血浆中超甲基化的RASSF1A基因
目的 探讨子痫前期孕妇血浆中超甲基化的Ras相关区域家族1A(ras association domain family 1A,RASSF1A)基因的水平变化及应用价值.方法 选择晚期妊娠子痫前期患者60例为实验组,其中轻度和重度子痫前期各30例;正常晚期孕妇60名为对照组.提取血浆游离DNA,经甲基化敏感的限制性内切酶处理,实时定量检测酶切前、后RASSF1A基因的浓度,同时检测β肌动蛋白(β-actin)基因以确保酶的完全消化.结果 子痫前期孕妇血浆中超甲基化的RASSF1A基因含量为正常妊娠组的3.31倍.轻、重度子痫前期患者浓度有差异,中位数分别为1659.00 copies/mL及2036.50 copies/mL(P<0.05).结论 子痫前期孕妇血浆中的超甲基化RASSF1A基因含量明显升高,且浓度水平与子痫前期的严重程度相关.
关键词： 孕妇血浆 超甲基化RASSF1A基因 子痫前期 定量检测 -
胎儿RhD基因型的诊断研究
[目的]建立一种新生儿RhD血型出生前基因诊断的方法.[方法]采用PCR技术对27例妊娠14～40周的单胎孕妇血浆中游离胎儿DNA进行RhD基因第10外显子的特异性扩增,扩增片段长度为186 bp,另外以等位基因RhCE基因为内对照,扩增片段长度为136 bp.[结果]10例Rhd-孕妇中,6例扩增出136 bp一条特异性片段,4例同时扩增出136 bp和186 bp两条特异性片段;17例RhD+孕妇血浆标本,均同时扩增出136 bp和186bp两条特异性片段,所有RhD-PCR扩增结果均得到新生儿脐血血清学检测结果的证实.[结论]PCR扩增孕妇血浆中游离胎儿DNA,是一种简便、快速且无损伤性的产前诊断胎儿RhD基因型的方法,值得临床推广应用.
