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转座突变株文献资料
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转座突变株插入位点侧翼序列的研究
目的 比较用于扩增弗氏枸橼酸杆菌转座突变株插入位点侧翼序列的3种PCR方法,以选择有效、简便的扩增方法进行转座突变基因的分析.方法分别采用step-out PCR、随机引物巢式PCR和反向PCR对弗氏枸橼酸杆菌转座突变株基因组中插入位点的侧翼序列进行扩增,并取产物进行直接测序,以对方法的有效性进行比较.结果随机引物巢式PCR方法简便,但扩增产物的条带较多,不利于后续的测序操作.Step-out PCR产物中非特异性片段更多,方法不可取,反向PCR法为简便有效.结论 反向PCR法适宜用于扩增弗氏枸橼酸杆菌转座突变株插入位点的侧翼序列,可以对突变基因进行定位.
