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  • 结核杆菌热休克蛋白65"自杀性"DNA疫苗的构建及其免疫效应研究

    作者:李向群;刘君炎;刘焰;居薇;刘斌波;李真;刘胜武

    目的 构建表达结核杆菌热休克蛋白65(HSP65)的"自杀性"DNA疫苗.方法 用聚合酶链反应,从我室构建的表达结核杆菌HSP65真核表达质粒中(pCHSP65),扩增出编码HSP65的基因,与"自杀性"DNA载体pSFV重组.经酶切、测序鉴定,间接免疫荧光(IF)证实其能表达HSP65后,将此"自杀性"DNA疫苗(pAHSP65)免疫小鼠.用ELISA、MTT法研究其免疫效应,并观察其对结核菌感染小鼠的保护作用.结果 酶切、测序鉴定结果证实为结核杆菌HSP65基因,在BHK21细胞中经IF证实有HSP65表达.该疫苗接种能诱导小鼠产生特异性抗体,刺激淋巴细胞增殖,并能抵抗结核杆菌的感染.结论 我们成功地构建了表达结核杆菌HSP65的"自杀性"DNA疫苗,该疫苗能诱导特异性免疫应答,并对结核菌感染的小鼠有保护作用.其免疫效应优于常规的HSP65 DNA疫苗.

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