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  • 表达PRRS病毒GP5、GP3和猪IL-18的核酸疫苗的构建及实验免疫研究

    作者:沈国顺;金宁一;秦晓光;尹荣兰;庄天中;马鸣潇;郑敏

    目的 获得安全有效的防治PRRSV核酸疫苗.方法 采用RT-PCR方法扩增了PRRSV长春分离株ORF5、ORF3基因,并将其插入真核表达载体PVAX1、pVIR-IL-18的CMV启动子下游,构建成真核表达质粒pVAX1-ORF5-ORF3和pVIR-IL18-ORF5-ORF3,通过Western blot及IFA等检测目的基因表达产物.同时进行了Balb/c小鼠免疫试验,检测免疫后小鼠的ELISA抗体水平和脾T淋巴细胞亚群数量.结果 所构建的2个重组DNA疫苗质粒在真核细胞能进行有效的转录,并表达了目的蛋白(GP5、GP3).pVIR-IL18-ORF5-ORF3免疫组的小鼠的ELISA抗体水平高于pVAX1-ORF5-ORF3和PRRS灭活苗免疫组,但差异不显著.CD8+T淋巴细胞亚群数量显著高于pVAX1-ORF5-ORF3和PRRS灭活苗组.结论 IL-18对猪的细胞免疫功能具有明显的促进作用.

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