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  • 肝癌DC疫苗诱导CTL的效应与机理研究

    作者:郭建巍;秦力维;蔡美英;魏大鹏;吕同德

    目的探讨肝癌DC疫苗诱导肝癌特异性淋巴细胞的效应与机理.方法用流式细胞术检测肝癌细胞表面HLA-DR的表达;用GM-CSF和IL-4从健康人外周血诱导DC,使之负载肝癌相关抗原,并在BCG HSP-70作用下活化,制成肝癌DC疫苗;用流式细胞术检测BCGHSP 70活化的负载肝癌抗原DC对自身淋巴细胞的活化;分别用MTT法和ELISA检测肝癌DC疫苗活化的淋巴细胞培养上清中TNF和IL-12水平;用原位杂交检测淋巴细胞内IFN-γ mRNA表达;用流式细胞术检测经DC疫苗活化后淋巴细胞表面Fas-L表达;后检测肝癌DC疫苗活化的淋巴细胞对肝癌细胞的特异性杀伤.结果肝癌DC疫苗在体外诱导活化的淋巴细胞对肝癌细胞的杀伤以CD4+T CTL为主,不但可以杀伤SMMC-7721细胞,同时对其它3种肝癌细胞也有不同程度的杀伤.CTL培养上清液和细胞中可分别检测到TH1型细胞因子TNF和IFN-γ mRNA.Fas和Fas配体途径发挥了重要的作用.结论为肝癌DC疫苗的进一步深入研究及今后的临床应用奠定了良好的基础.

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