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vp3+vp1文献资料
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腺病毒介导HAV结构基因表达及其产物的免疫学性质检测
目的探讨重组腺病毒免疫实验动物后的抗体反应.方法利用RT-PCR方法,从HAV-L8株的RNA中扩增出结构蛋白vp3+vp1基因,克隆到穿梭质粒pXCX2 NotⅠ上.采用磷酸钙-DNA共沉淀技术,将E1区缺失的复制缺陷型腺病毒载体pJM17与pXCX2-CMV-HAV共转染293细胞.结果通过胞内同源重组,经RT-PCR、免疫荧光染色和蛋白印迹鉴定表明,获得了复制缺陷型重组腺病毒rAdHAV.纯化后的rAdHAv滴度为1×109.0 TCID50/mL.昆明种小白鼠口服rAdHAV后,诱导产生了抗HV IgG.结论复制缺陷型腺病毒可望成为发展口服病毒疫苗的有效载体系统.
