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  • 膜结合表达对HCV C基因免疫的影响

    作者:廖国阳;赵玮;杨卉娟;李卫东;王明秀;姜述德

    目的探讨膜结合表达对基因免疫的影响.方法流感病毒跨膜蛋白基因修饰带HBV preC分泌型信号肽的HCV C69基因,构建pc69TM质粒;35S-甲硫氨酸代谢标记和免疫沉淀检测质粒体外瞬时表达蛋白;肌肉免疫Balb/c小鼠.结果 pc69TM基因表达出的蛋白存在于膜上.免疫鼠淋巴细胞对特异性抗原刺激的增殖能力pc69TM较分泌表达型质粒pc69显著增强(P=0.03),而2种质粒诱导小鼠产生抗体效价差异不显著(P=0.765).结论膜结合表达能增强HCV C69基因免疫的淋巴细胞增殖能力.

  • 双表达载体研究GM-CSF对HCV C基因免疫应答的影响

    作者:廖国阳;姜述德;孙明波;杨卉娟;陈俊英;张新文

    目的 HCV C蛋白基因诱导的免疫应答较弱,因而增强HCV C蛋白基因免疫对于开发HCV疫苗具有极其的重要性.方法将GM-CSF基因与pc154基因插入双表达载体pcDNA3.0 BA构建成双价质粒pcDNA3.0 BApc154GM-CSF,肌肉免疫Balb c小鼠.结果 GM-CSF和pc154在Cos-7细胞中同时获得瞬时表达;pcDNA3.0 BApc154GM-CSF双价质粒较单价pcDNA3.0 BApc154诱导小鼠产生抗体的几何平均滴度显著增高(P=0.04),而pcDNA3.0 BApc154+pcDNA3.0BAGMCSF混合质粒较单价质粒pcDNA3.0BApc154诱导小鼠产生抗体的滴度极显著降低(P<0.01).HCV C蛋白抗原特异性的脾淋巴细胞增殖能力,双价质粒较单价及单价混合质粒极显著增高(P<0.01).结论双表达载体同时输送GM-CSF与pc154基因能增强Balb/c小鼠对HCV C蛋白基因的体液免疫应答及免疫鼠脾淋巴细胞对特异性抗原刺激的增殖能力.

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