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表位特异性CTL文献资料
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乙肝病毒蛋白抗原表位特异性CTL体外扩增条件优化
目的 优化乙肝蛋白抗原表位特异性CTL体外扩增条件.方法 选择急性自限性HBV感染者外周血,分离PBMC,体外用乙肝蛋白抗原表位多肽特异性刺激,特定天数后收集细胞,用CD8抗体与MHC-I类分子HBV抗原肽四聚体进行染色流式检测,检测扩增后乙肝蛋白抗原表位特异性CTL在CD8阳性细胞群中所占的频率.结果 1)在不同多肽浓度刺激下,当浓度在20 us/mL时,所测得特异性CTL占PBMC中CD8+T细胞的频率达到高峰;2)固定刺激多肽浓度,在不同的刺激天数获得的特异性CTL频率第10天时高;3)在不同的细胞因子培养条件中,当加入的细胞因子IL-2,IL-7,IL-15组合时所获得的特异性CTL频率高.结论 在刺激肽浓度为20 μg/mL,并加入适量的细胞因子(IL-2,IL-7,IL-15),刺激10天的条件下,所获得的乙肝蛋白抗原特异性CTL频率高.