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人TLR4文献资料
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抗人Toll样受体4单克隆抗体的制备及其生物活性研究
目的 运用单克隆抗体技术制备抗人Toll样受体4(TLR4)单克隆抗体(mhTLR4抗体),并鉴定其生物学活性.方法 以重组人TLR4(rhTLR4)作为抗原,腹腔注射免疫Balb/c小鼠.分离小鼠脾脏B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合并培养,挑选阳性杂交瘤细胞,扩大培养,制备和鉴定mhTLR4其生物学效应.结果 经3次免疫后的小鼠血清中抗rhTLR4抗体的效价具有较高水平的表达.1:500的小鼠免疫血清可明显抑制人PBMC的TNF-αt表达.分离小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,获得3株阳性单克隆杂交瘤细胞.其中2株经过增殖培养、纯化浓缩制备出较高产量的鼠抗人TLR4单克隆抗体.生物学活性测定表明,产生的抗rhTLR4单克隆抗体,能够明显地阻断脂多糖(LPS)诱导的人PBMC细胞对TNF-α的表达.结论 本文制备的鼠抗人TLR4单克隆抗体,经鉴定具有较高的阻断内毒素信号传导的效应.为进一步研制人源化抗TLR4抗体、研制新一代抗内毒素靶向药物奠定了基础.
