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限制酶切指纹-单链构象多态性文献资料
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限制酶切指纹-单链构象多态性--一种有效的大片段中突变的检测方法
目的建立一种简便、价廉、有效地在大片段中检测突变的限制酶切指纹-单链构象多态性(restriction endonuclease fingerprinting-single strand conformation polymorphism,REF-SSCP)方法.方法以耳聋患者基因组DNA为模板,扩增Cx26基因片段,通过对扩增产物进行单链构象多态性、限制酶切指纹-单链构象多态性和DNA测序,比较REF-SSCP技术对大片段中突变的检出效率. 结果长度为724 bp的扩增产物SSCP结果未显示差异,REF-SSCP显示3种不同带型,经测序发现该基因中的79 G→A突变,突变情况与REF-SSCP带型完全吻合,检出率为100%. 结论所建立的REF-SSCP技术适用于大样本量地检测大片段DNA中的突变.
关键词： 限制酶切指纹-单链构象多态性 CX26基因 突变检测
