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  • 水性胶层析改良抗球蛋白试验方法的建立

    作者:王红梅;田晶晶;段生宝;丁少华;陈晔洲;李勇

    目的 建立水性胶层析改良抗人球蛋白试验(HCI-Coombs T)方法.方法 将含红细胞和血清的反应液置于水性胶介质试管中,低速离心使红细胞穿过水性胶到达试管底部,而血清中非特异性球蛋白等滞留在水性胶之上,弃去反应液和水性胶介质后加入抗人球蛋白试剂,离心后观察血凝结果.结果 结合了血清中特异性抗体的红细胞通过水性胶至试管底部,与后加入的抗人球蛋白发生凝集反应,即为阳性结果;反之为阴性反应.以HCI-CoombsT做直接和间接抗人球蛋白试验,其检测抗-D的敏感性与试管法Coombs T一致,低于微柱凝胶法.抗-A、抗-B试剂不能通过水性胶介质,沉淀中非特异性球蛋白残余量4μg/mL,沉淀中残余的碱性磷酸酶经3 200倍稀释抗人球蛋白OD值为0.175,而常规洗涤3次后残余蛋白OD值1.235.结论 采用HCI-CoombsT,1次离心便分离反应液中的红细胞抗原抗体复合物和非特异性球蛋白经水性胶介质,离心沉淀中残余非特异性球蛋白不足以中和随后加入的抗人球蛋白试剂,避免了试验中繁琐的洗涤程序.可望应用于在临床常规血型相容性试验中.

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