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不同数量BMSCs对大鼠背根神经节生长影响的实验研究
目的 BMSCs作为雪旺细胞的替代细胞可提高周围神经损伤修复效果,但目前对于神经支架内添加适宜的种子细胞数量未达成共识.研究不同数量BMSCs对大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)生长的影响.方法 取4周龄雄性SD大鼠3只,体重80~100 g,体外培养扩增BMSCs.取新生1~2日龄SD大鼠3只,雌雄不限,体重4~6g,制备DRG.取第3代BMSCs制备BMSCs-生物蛋白胶复合物,按照加入细胞数量的不同,将实验分为A组(1×103个)、B组(1x104个)、C组(1×105个)和D组(0个),并与SD大鼠DRG共培养.48 h后通过形态学观察,神经丝蛋白200和雪旺细胞S-100免疫荧光染色,对SD大鼠DRG轴突生长长度、雪旺细胞迁移距离和轴突面积指数进行定量评价.结果 48 h后可见各组BMSCs生长出多个长突起;雪旺细胞移行和轴突从DRG长出,呈多方向性生长;BMSCs生物蛋白胶具有生物活性且影响DRG生长.A、B、C组DRG轴突生长长度及雪旺细胞迁移距离均明显大于D组(P<0.05),C组小于B组(P<0.05),A、C组间及A、B组间差异无统计学意义(P>0.05).A、B组轴突面积指数明显大于D组(P<0.05),C组大于D组但差异无统计学意义(P>0.05),A、B、C组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 乳鼠DRG体外培养实验,可作为研究周围神经损伤修复的体外模型.不同数量BMSCs生物蛋白胶复合物对DRG生长的影响具有量效关系,为组织工程神经选用合适数量BMSCs提供了理论依据.