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微小核糖核酸-204和211在人胚胎干细胞向视网膜色素上皮细胞分化过程的变化
目的 观察人胚胎干细胞(hESC)向视网膜色素上皮(RPE)细胞诱导分化过程中微小核糖核酸(miRNA)-204和211的变化特征.方法 采用自然分化法诱导hESC向RPE细胞分化,细胞鉴定.按细胞诱导分化时间秩序,分为hESC组、含色素细胞组、hESC源性RPE细胞组和原代培养的人胎RPE(hfRPE)细胞组.行miRNA基因表达谱芯片分析、miRNA-204和211实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测.结果 miRNA芯片分析结果显示,随细胞诱导分化过程,miRNA-204持续上调.其中,含色素细胞组是hESC组的5.026倍,hESC源性RPE细胞组是含色素细胞组的3.337倍；hfRPE细胞组是hESC源性RPE细胞的13.574倍.miRNA-211在细胞诱导分化过程中上调不明显,但从hESC源性RPE细胞到hfRPE细胞,上调倍数为44.333倍,是miRNA表达谱中差异大的miRNA.RT-PCR检测结果显示,hESC组、含色素细胞组、hESC源性RPE细胞组、hfRPE细胞组miR-204相对表达量分别为91.81±4.43、2 263.09±206.39、5 996.80±235.42、171 676.45±999.82,差异有统计学意义(t=18.22、20.66、279.38,P＜0.001)；miRNA-211相对表达量分别为2.23±0.31、129.33±3.75、125.76±4.78、16682.00±352.97.含色素细胞组和hESC细胞组、hfRPE细胞组和hESC源性RPE细胞组miR-211相对表达量比较,差异均有统计学意义(t=58.58、81.24,P＜0.001).结论 miRNA-204和211在hESC向RPE细胞诱导分化过程中持续单一变化.
