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  • 未折叠蛋白反应参与视网膜脱离后细胞损伤的研究

    作者:刘海洋;孙晓东;汪枫桦;许迅;张娴;张皙

    目的 观察未折叠蛋白反应(UPR)标志物葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在大鼠实验性视网膜脱离(RD)后不同时期的基因与蛋白水平的表达情况.探讨UPR与RD后细胞损伤的关系.方法 88只Wistar大鼠分为2组:正常对照组11只鼠;RD组77只鼠,左眼视网膜下注射10 mg/ml透明质酸钠建立RD模型,分别在RD后1/2、1、2、4、8、16、32 d收集大鼠左眼球及视网膜组织,RD后各时间组每组各11只大鼠.用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测视网膜组织中GRP78 mRNA的表达;Western blotting方法检测视网膜组织中GRP78蛋白水平的表达;免疫荧光及激光共聚焦显微镜技术观察GRP78在视网膜各层细胞的分布. 结果 建立大鼠RD模型后,1/2、1、2、4 d组大鼠视网膜GRP78 mRNA表达显著升高(P<0.05);RD后各组大鼠视网膜GRP78蛋白水平均高于正常对照组(P<0.05),8、16、32 d组大鼠GRP78蛋白水平为高峰;GRP78蛋白在RD大鼠视网膜全层细胞均有表达. 结论实验性RD后,启动UPR保护机制,通过上调分子伴侣GRP78的表达,引导蛋白质正确折叠,降低细胞损伤;这为通过干预该反应降低RD患者的细胞损伤,促进视功能恢复提供了理论依据.

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