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眼肌动蛋白文献资料
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细胞外基质蛋白和转化生长因子β2共同作用诱导人视网膜色素上皮细胞向肌纤维母细胞转化
目的 了解转化生长因子β2(TGFβ2)和细胞外基质(ECM)调节人胚胎视网膜色素上皮(hfRPE)细胞向肌纤维母细胞分化的作用,确定这种调节的信号传导机制.方法 hfRPE细胞培养于由ECM包被或未包被的培养皿上,培养液中加入或不加入TGFβ2,用免疫组织化学、流式细胞仪、蛋白印迹技术检测α-平滑肌机动蛋白(α-SMA)的表达.在培养液中分别加入calphostin C,染料木黄铜(genistein),PD98059和渥曼青霉素(Wortmannin),测定α-SMA的表达.结果 hfRPE细胞培养于ECM包被的培养板上,培养液中加入TGFβ2后,出现明显的形态学改变,包括细胞伸展变长,可见肌动蛋白微丝的形态.流式细胞仪及免疫细胞化学检测结果显示,培养液中加入TGFβ2可明显增加α-SMA的表达,并与剂量成正相关.当TGFβ2的刺激浓度为50 ng/ml时,与培养于未包被的培养板上的hfRPE细胞相比,用纤维连接蛋白(FN)包被培养板后,总的平均荧光强度(TMFI)增加(38.01±1.14)%(P＜0.05).蛋白印迹技术检测显示同样的结果.而上述效应可以大部分被蛋白激酶C(PKC)通路抑制剂calphostin C(10 nmol/L)抑制(P＜0.01).结论 TGFβ2可诱导hfRPE细胞向肌纤维母细胞转化,并与其剂量成正相关,这种作用可被FN加强.TGFβ2和ECM的这种调节作用可能是通过PKC细胞内信号传导通路而发挥作用.
