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3 -脱氧葡萄糖醛酮还原酶文献资料
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3-脱氧葡萄糖醛酮还原酶药物筛选体系的建立及应用
目的 从鸡肝中提取3 -脱氧葡萄糖醛酮(3- DG)还原酶,并建立3- DG还原酶体外反应体系筛选药物.方法以辅酶NADPH的消耗量为评价指标来表示3-DG还原酶的活性,通过对反应体系底物3- DG、辅酶NADPH、酶量和反应时间的优化,考察温度等影响因素,建立3 - DG还原酶体外反应体系并应用于寻找提高3- DG还原酶活性的药物.结果优化后的反应体系为:100μg·mL-1 3-DG溶液、250 μg·mL-1 NADPH、酶液各20μL,用50 mmol·L-1的Na2 HPO4 - NaH2 PO4缓冲液(pH6.4)调反应体系至200 μL,混合物于37℃反应40 min;以NADPH的消耗量来定义3- DG还原酶的酶活单位,并应用于17种药物的筛选.结论该反应体系可用辅酶NADPH的消耗来反映体系中3- DG还原酶的活性,并能为寻找提高3- DG代谢酶活性的药物提供方法.
关键词: 3 -脱氧葡萄糖醛酮还原酶 反应体系 药物筛选