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LI溶血素文献资料
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ILO与LLO协助李斯特菌黏附、侵袭细胞及胞内增殖的比较研究
目的 研究李斯特菌溶血素的主要功能,比较两种李斯特菌——绵羊李斯特菌(Listeria ivanovii,LI)和单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)的溶血素对细菌黏附细胞等作用的强弱.方法 构建含有LIi-hly基因上、下游同源序列和lacZ基因或hly基因的打靶质粒,利用基因重组技术构建LI溶血素(ILO)缺陷的LI重组菌株LI△i-hly∷lacZ和回补表达LM溶血素(LLO)的重组菌株LI△i-hly∷hly;比较2株重组菌与野生LI对人肝癌HepG2细胞的黏附、侵袭能力;比较3株菌在巨噬细胞RAW264.7内的增殖能力.结果 重组菌株LI△i-hly∷lacZ和LI△i-hly∷hly的基因序列与预期相符;LI△i-hly∷hly、LI和LI△i-hly∷lacZ对HepG2细胞的黏附率分别为(3.43±0.82)％、(3.43±1.59)％和(3.41±1.12)％,侵袭率分别为(1.74±0.46)％、(1.22±0.75)％和(1.39±0.46)％,差异均无统计学意义;胞内增殖实验结果表明,与野生株相比,ILO缺陷株LI△i-hly∷lacZ在巨噬细胞内的增殖量降低,LI△i-hly∷hly的增殖量升高.结论 LI在细胞内的增殖水平与ILO有关,ILO缺失抑制了LI在细胞内的增殖能力,LM溶血素LLO协助细菌逃离吞噬泡进入宿主细胞质的能力强于LI溶血素ILO.
