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侧缘细胞文献资料
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小鼠CD45-/CD31+肺侧缘细胞诱导分化为血管平滑肌细胞的体外培养
目的 探讨在体外诱导分化CD45-/CD31+肺侧缘细胞的特性.方法 取小鼠肺组织,流式细胞术分选小鼠CD45-/CD31+肺侧缘细胞;免疫荧光检测其侧缘细胞表型标记物ATP结合盒转运蛋白G2(ABCG2)和干细胞表面标记物干细胞抗原1 (stem cell antigen 1,Sca1)的表达,逆转录PCR检测其ABCG2、平滑肌细胞标志物平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin,SMA)及血管平滑肌细胞标志物α-血管平滑肌原肌球蛋白(α-SMT)表达.分选的CD45-/CD31+肺侧缘细胞体外培养14 d后,细胞克隆形成实验和流式细胞术对其进行鉴定.分选的CD45 /CD31+肺侧缘细胞体外诱导14 d后,免疫荧光检测细胞α-SMT的表达,逆转录-PCR检测分化诱导前后细胞中的ABCG2、SMA及α-SMT基因表达.结果 成功分选出目的细胞群CD45-/CD31+肺侧缘细胞,其表达ABCG2和Sca1蛋白,ABCG2和SMA基因,不表达α-SMT基因.细胞体外培养14d后,出现的细胞克隆鉴定为CD45-/CD31+肺侧缘细胞.CD45 /CD31+肺侧缘细胞分化诱导前表达ABCG2,少量表达SMA,不表达α-SMT,分化诱导14 d后表达α-SMT基因和蛋白、SMA基因,不表达ABCG2基因.结论 CD45-/CD31+肺侧缘细胞是血管平滑肌细胞的祖细胞,具有干细胞分化特性.在体外培养可分化为血管平滑肌细胞.
