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激光诱导荧光-毛细管电泳文献资料
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双重PCR-毛细管电泳法快速检测大豆中转基因成分
目的建立抗草甘膦转基因大豆的快速检测方法.方法针对转基因大豆基因组中被导入的35S启动子、NOS终止子和CP4-EPSPS抗草甘膦基因等外源基因,自行设计了两对引物,采用双重PCR同时扩增上述基因,用8 g/L羟丙基甲基纤维素为筛分介质,在50 cm×100 μm i.d.涂壁毛细管中,于-10 kV电压下用激光诱导荧光-毛细管电泳检测转基因大豆的 PCR扩增产物.结果在优化的PCR反应和毛细管电泳条件下,本法可以同时检测出转基因大豆样品中三种外源基因,双重PCR扩增产物经测序证实与原基因序列完全一致,表明本研究设计的引物合理,扩增结果可靠.毛细管电泳进样量仅需5 nl,分析时间为24 min,迁移时间的相对标准偏差≤3.2%.结论本方法较常规琼脂糖凝胶电泳特异性高,分析时间短,重现性好,检测灵敏,适合于大豆中转基因成分的快速检测.
