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免疫酶斑点法检测HIV-1 DNA
多聚酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)在艾滋病毒感染的诊断、检测中起着重要的作用[1].为了确认PCR扩增的片段,常采用放射性标记的核酸探针对扩增产物进行Sorthern杂交.近年来采用生物素、地高辛等非放射性标记物的技术得到了广泛应用[2].本文介绍了用生物素标记HIV-1 DNA的扩增产物,然后用免疫酶斑点法(immuno enzyme dot assay, IEDA)直接检测扩增产物的方法.
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血清丙型肝炎病毒抗原的免疫酶斑点法检测
目的:建立一种可筛查早期HCV感染者的简单快捷方法.方法:制备特异性的抗HCV核心蛋白和抗HCV NS3的单克隆抗体(mAb)酶标记物,应用免疫酶斑点法检测各种类型肝炎患者和正常人血清中的HCV-Ag,并与双抗体夹心ELISA检测HCV-Ag及RT-PCR检测HCV RNA的结果进行比较.结果:免疫酶斑点法检测表明,HCV-Ag的检出率在抗HCV抗体阳性、乙肝和非甲非戊肝炎患者中,分别为15.4%(8/52)、1.73%(19/1 099)和1.03%(1/97);在81例甲肝和67例戊肝患者及50例正常人中均未检出.免疫酶斑点法与双抗体夹心ELISA及RT-PCR的检测的结果没有显著性差异,但其与RT-PCR检测结果有一定的相关性.结论:免疫酶斑点法特异性强,操作简便快捷,不需要特殊仪器设备,为HCV的早期诊断和常规筛查提供了有效的方法.