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小干扰RNA 对高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞Snail 1表达的抑制作用
目的: 观察小干扰RNA 对高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞Snail1表达的抑制作用及意义.方法: 将原代培养肾小管上皮细胞分为5组,(1)对照组(含糖5.5 mmol/L);(2)高糖组(含糖25 mmol/L);(3)Snail1 siRNA处理组,转染Snail1 siRNA,6 h后更换为高糖(含糖25 mmol/L)培养;(4)Control siRNA处理组,转染Control siRNA作为阴性对照,6 h后换为高糖(含糖25 mmol/L)培养;(5)高渗组(含甘露醇19.5 mmol/L).72 h后收集细胞,用Western blot检测Snail 1、Vimentin蛋白表达,用半定量RT-PCR检测Snail 1、Vimentin、成纤维细胞特异性蛋白 - 1(FSP-1)和纤维连接蛋白(FN)的mRNA表达.结果: 肾小管上皮细胞转染Snail1 siRNA后,与高糖组比较Snail1 mRNA和蛋白表达分别下降62%和68%(P<0.01);与高糖组比较,Snail1 siRNA处理组Vimentin、FSP-1、FN蛋白和(或)mRNA表达显著下调(P<0.01).结论: (1)小干扰RNA 能显著抑制高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞Snail1表达;(2)Snail1参与了高糖作用下肾小管上皮细胞病理改变,并在细胞外基质的沉积中起重要作用.
